A 色譜柱驗(yàn)收
檢查外觀是否完好；
檢查柱子的規(guī)格型號(hào)，是否與您的需求相符；
如果您想對(duì)新色譜柱的性能進(jìn)行測(cè)試，可以按照柱性能測(cè)試報(bào)告上的條件進(jìn)行測(cè)試。
B 色譜柱安裝
該色譜柱與外徑為1/16英寸的PEEK管線或不銹鋼管線好匹配；
為減小死體積，柱前和柱后的管線內(nèi)徑應(yīng)不超過(guò)0.01 英寸(0.25 mm)；
如果您使用的是PEEK管線，您應(yīng)選擇PEEK接頭使管線與色譜柱連接；如果您使用的是不銹鋼管線，您可以選擇PEEK接頭或不銹鋼接頭，當(dāng)使用不銹鋼接頭時(shí)，應(yīng)確保管線與柱頭緊密結(jié)合后再固定韌環(huán)，這樣可以防止管線與色譜柱連接處產(chǎn)生死體積。
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C 流動(dòng)相使用指導(dǎo)
該反相色譜柱，可以使用水或有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相，并且為了特殊需要還可以在流動(dòng)相中加入酸、堿、鹽；
該色譜柱能夠耐受0%-100%有機(jī)相；
該色譜柱的pH值耐受范圍為1.5-10.0，流動(dòng)相的pH值不應(yīng)超過(guò)這一范圍，否則色譜柱性能和壽命會(huì)受到影響；
對(duì)于混合流動(dòng)相，應(yīng)確保不同溶劑間的良好互容；
對(duì)于有機(jī)溶劑-緩沖溶液體系，應(yīng)確保緩沖鹽不會(huì)析出；
不同流動(dòng)相的黏度有差別，使用不同的流動(dòng)相時(shí)，色譜柱產(chǎn)生的壓強(qiáng)會(huì)有差別；使用水(包括緩沖溶液)-乙腈體系時(shí)，乙腈含量為20%時(shí)產(chǎn)生的壓強(qiáng)*大；使用水(包括緩沖溶液)-甲醇體系時(shí)，甲醇含量為50%時(shí)產(chǎn)生的壓強(qiáng)*大；Platisil(鉑金)系列色譜柱的*高承受壓強(qiáng)遠(yuǎn)高于反相模式下可能產(chǎn)生的*高壓強(qiáng)；
在10-40 °C之間，使用較高的柱溫能夠降低色譜柱壓強(qiáng)并改善分離效果；
用于流動(dòng)相配制的溶劑應(yīng)為HPLC級(jí)或更高級(jí)別，作為添加物的酸、堿、鹽盡量使用HPLC級(jí)別；
色譜柱入口和出口安裝了2 μm篩板，為避免色譜柱堵塞，流動(dòng)相應(yīng)經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過(guò)濾；
流動(dòng)相應(yīng)該有效脫氣后再使用，以避免在系統(tǒng)中產(chǎn)生氣泡導(dǎo)致的泵和檢測(cè)器不穩(wěn)定；
純水或緩沖鹽水溶液易滋生微生物造成流動(dòng)相污染，純水或緩沖鹽水溶液作為流動(dòng)相組分時(shí)，24小時(shí)內(nèi)應(yīng)更換新的溶液。
D 轉(zhuǎn)換流動(dòng)相的注意事項(xiàng)
您收到的色譜柱是保存在65%乙腈水溶液中的，使用前建議您用甲醇或乙腈對(duì)新色譜柱進(jìn)行活化沖洗；
純有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑含量較高的流動(dòng)相與含緩沖鹽的流動(dòng)相變換，不應(yīng)直接替換，兩者之間應(yīng)使用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液進(jìn)行過(guò)渡，過(guò)渡溶劑體積不少于10倍柱體積；
用某一種流動(dòng)相代替上一種流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)確保兩者互容。
E 色譜柱保存
超過(guò)24小時(shí)的時(shí)間不使用色譜柱，*好將色譜柱保存在乙腈或甲醇中；
操作時(shí)的流動(dòng)相中若無(wú)酸、堿、鹽，可以用乙腈或甲醇沖洗20倍柱體積后直接封存；操作時(shí)的流動(dòng)相中若有酸、堿、鹽，應(yīng)先用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液沖洗20倍柱體積，然后再用乙腈或甲醇沖洗，然后封存；
使用隨色譜柱一起的PEEK螺旋塞將色譜柱的入口和出口密封，以防止柱中溶劑揮發(fā)。
F 對(duì)樣品的要求
用于進(jìn)樣的樣品溶液須經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過(guò)濾；
如果樣品提取自復(fù)雜基質(zhì)(比如動(dòng)植物基質(zhì))，*好對(duì)提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)募兓幚?，以避免污染色譜柱，影響分析效果和色譜柱壽命；
安裝保護(hù)柱可以防止顆粒物堵塞色譜柱，并預(yù)先吸附強(qiáng)保留物質(zhì)，以避免其污染色譜柱。
G 色譜柱再生方法
當(dāng)色譜柱壓強(qiáng)明顯升高時(shí)可對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理。用相當(dāng)20倍柱體積的溶劑按下列次序沖洗色譜柱：10％甲醇水溶液→甲醇→異丙醇→甲醇。該程序適用于反相色譜柱：C18, C8, PH, CN。如果色譜柱的壓力升高是由顆粒雜質(zhì)堵塞引起，再生處理效果不明顯。
柱床體積計(jì)算方法V=3.14*d2*L/4
d為色譜柱內(nèi)徑，單位為cm；L為柱長(zhǎng)，單位為cm。
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